材料污染与材料褐化、材料玻璃化被称为并成为组织培养“3大杀手”。螨虫给植物组织培养带来的最大危害是造成接种材料的直接污染。
据统计,螨虫污染一旦发生,如果采取措施不力,其材料污染率可高达70以上,甚至100%,从而使一些植物的组培研发无法进展,使前期成果付诸东流,给生产厂家带来严重的经济损失。
在植物组织培养中,导致产生螨虫污染的主要途径有:
1.接种操作者(人的因素)。因为人体的皮肤与头发通常都有可能带有螨虫,如果着装不当或不讲究个人卫生,通常就可能成为螨虫发生的源头;
2.植物体或外植体。植物体是植食性螨虫的主要寄主,外植体如清晰不彻底,就会通过接种操作带入生产车间。这也是为什么在组织培养中要求外植体制种不得与继代接种同台操作甚至分房间进行的最重要原因;
3.动物体,也就是小型昆虫,如苍蝇、蚊虫、蜘蛛等带来的污染;
4.其他杂物,譬如食品、药品、纸张等,因此,要严格禁止各类生产人员将餐饮食品带进组织培养生产车间。
组织培养中螨虫污染的特征
组织培养中螨虫污染同植物病害发生特征类似,有其发生发展的规律,其症状的表现形式,归纳起来有如下几个特点:
1.污染发生的不平衡性:污染发生通常不是均衡分布,而是存在一个明显的高污染中心区,并由该区逐渐向四周扩散,中心区处的污染明显较低;
2.污染的爆发性:螨虫导致材料污染最终是真菌污染,由于螨虫爬行与真菌扩散的相互促进作用,致使螨虫污染一旦发生,其扩散速度同一般真菌污染要快得多,通常在1-2天内即可布满整个培养容器,而且往往是先出现点状分布,之后便迅速扩大至满杯(瓶)。
3.污染范围广:遭受螨虫污染的容器其污染部位不仅仅分布培养基表面,往往会进一步扩散到瓶壁,再进一步扩散到容器口部,致使在瓶口处就可见明显真菌污染。
4.在培养较久的材料上,可见菌落及菌丝,而且还可清晰见到丝状或网状物,一些污染严重的培养容器中,肉眼仔细辨别可见螨虫在爬行。
根据上述特征,基本上可以正确辨识螨虫污染的存在。另外,由于螨虫活动具有显著地避光特性,将被污染的植物材料放置在黑暗处1-2小时,然后在日光灯下仔细观察,如果为螨虫污染,则在杯内或瓶内能见到螨虫爬行过的线状痕迹。
植物组织培养中螨虫污染预防与治理方法
组培生产中预防螨虫污染要把好几个关:
1.做好人的工作,即做好员工个人意识培训与个人卫生控制关。充分做好员工的产前意识培训,让员工充分认识组培污染及螨虫发生与个人卫生习惯的密切联系,培训员工形成良好的个人卫生习惯,防止人为因素带来的螨虫污染。
2.做好环境卫生控制关,尤其要做好接种操作室的环境控制工作。严格禁止员工带入与生产无关的物件,如纸张、饰件(如棉质小玩具等),更不得带入餐点或零食,在做好常规消毒的同时,更要定期做好接种室的卫生清洁工作。
3.把好培植室的螨虫控制关。既要做好常规清洁、消毒、整理工作,还要注意定期采用杀螨类药物搽洗培植架,以预防螨虫的发生。
4.把好车间材料设计关。无论是材料培植室,还是接种操作室,其房间装修包括房门、窗户、天花板等,其面层切忌采用木质装饰材料,地板不得铺垫毛料地毯,因为木材和地毯本身就是螨虫栖身的重要场所和食料。
螨虫一旦发生,可按如下步骤做好防治工作:
第1步:彻底做好环境卫生清洁工作,包括培植室的墙壁四周、角落、灯架、培植架体、地板的卫生清洁,做到彻底、全面,不留死角;
第2步:做好隔离工作,也就是要将与有螨污染或怀疑有螨污染的所有相关物品隔离,防止污染的扩散;
第3步:药剂杀螨。通常采用的药品有:阿维菌素(风雷激1200倍液),具有强烈的杀卵力和杀成螨力;2.5%华光霉素可湿性粉剂(400~1200倍液),具有杀螨、杀真菌作用;三氯杀螨醇(800~1200倍液),具有强烈的杀卵力和杀成螨力;28.3%尼克螨乳油(1500~2000倍液),具有强烈的杀卵力和杀成螨力,对害螨击倒迅速,残效期长。
喷药前可将培植室关灯黑暗1-2小时,利用螨虫的避光性以刺激螨虫的活动。另外,如果螨虫发生面积较大,要注意喷药同一时间进行,以利于彻底杀死螨虫。